超声波提取对黑木耳多糖溶出量的影响研究

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超声波提取对黑木耳多糖溶出量的影响研究

赵梦瑶

张拥军’

蔡振优

李佳

（中国汁量学院生命科学学院，浙江杭州３１００１８）

摘要以黑木耳多糖得率为指标，采用不同的粉碎Ｔ艺与提

取亡艺，研究粉碎粒度超声处理对黑木耳多糖溶出量的影响。结果表明．粉碎与超声协同处理对黑木耳多糖的溶出鼍有较大影响；超声处理时，原料粒度越小．多檐的溶出量越多，３００目超声６４ｍｉｎ时，多糖的溶出量是４０目的５．３２倍。关键词

黑木耳多糖粒度超声波

文章编号

１０００—８３５７（２０１１）０１—００５７—０２

黑木耳（Ａｕｒ／ｃｕ／ａｒ／ａａｕｒ／ｃｕ／ａ）是我国珍贵的药用和食用真菌。味道鲜美，营养丰富，近１０余年来有关黑木耳的药理学研究，揭示了黑木耳具有广泛的牛理活性及药用价值，尤其对黑木耳中的多糖类物质的报道较多１１ＷＩ。由于黑木耳细胞壁关键组分几丁质和Ｂ一葡聚糖，质地坚韧，不易被人体所消化。细胞壁内的多糖类物质很难透过细胞壁，被人体所吸收，因而胞壁破碎是提取细胞内多糖类物质的关键步骤。

多糖常用的提取方法有热水浸提法、酸浸提法、碱浸提法、酶法、超声破碎法等。传统黑木耳多糖提取采用水体系，需要多次浸提，操作时间长，收率低；酸浸提法和碱浸提法容易使部分多糖发生水解，破坏多糖的活性结构、减少多糖得率；酶法提取的成本较高且需要专一性破壁酶才能达到理想效果；超声破碎法是利用超声波（频率＞２０ｋＨｚ）具有的机械效应、空化效应，通过增大介质分子的运动速度．增大介质的穿透力以提取有效成分的技术。具有提取过程不需要加热，适用于热敏物质，节省能源，提取过程为物理过程，不影响有效成分的生理活性，溶剂用量少，提取物有效成分含量高等优点。目前采用超声破碎技术对黑木耳多糖的研究报道较少，刘大纹等懈曾利用超声波协同纤维素酶提取超微粉碎黑木耳粉中的粗多糖，得到较好效果，但提取成本较高。

研究采用超声破碎法对不同粒度黑木耳进行有效破壁，考察超声破碎法对不同粉碎粒度黑木耳多糖溶出效果的影响，为今后合理开发利用的黑木耳资源，乃至工业化生产提供理论依据。

１材料与方法

１．１

材料与试剂黑木耳（由浙江省富来森绿色产业集团公

司提供）；无水乙醇、无水甲醇、浓硫酸、葡萄糖、苯酚均为分析纯，水为去离子水。

１．２实验仪器ＵＶ一２８００紫外可见分光光度计（上海尤尼柯仪器有限公司）；ＲＥ一５２９９旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器

收稿１３期：２０１０—０７—０ｌ一稿；２０１０—０７—０９修改稿。基金项日：浙江省科技厅霞点项日（２００７Ｃ２２０８６）

＋通讯作者。张拥军，女．１９７１年乍，教授，研究方向为农产品加工。电话：０５７ｌ一８６８３５７０３。ｅ－ｍａｉｌ：ｙｊｚｈａｎｇ＠ｖｉｐ．１６３．ｃｏｒｎ．

万方数据

厂）；ＫＱ－３００Ｂ超声波清洗器（上海精密仪器仪表有限公司）；ＳＨＡ－Ｂ数显水浴恒温振荡器（江苏金坛市亿通电子有限公

司）。

１．３

试验方法

１．３．１超声条件下的黑木耳糖类物质的溶出量准确称取不同粉碎粒度（４０目、１００目、１５０目、２００目、３００目）的黑木耳粉２．０００ｇ．料液比为ｌ：４０，在２２ｋＨｚ的超声波下，考察不同超声时间黑木耳中总檐、还原糖、多糖的溶出量。设定时间分

别为８、１６、３２、６４ｍｉｎ。

１．３．２总糖的测定（苯酚一硫酸法）及还原糖测定（ＤＮＳ法）总糖标准曲线绘制：分别量取Ｏ．１ｍｇ／ｍＬ的葡萄糖溶液Ｏ．１、

Ｏ．２、Ｏ．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８

ｍＬ置于１０ｍＬ具塞试管中，依

次添加水使终体积为１．０ｍＬ，空白对照为水１．０ｍＬ，各加５％

苯酚溶液１．０ｍＬ，振摇混匀，加５．０ｍＬ硫酸，迅速振摇混匀，

于室温下放置３０ｍｉｎ，按照分光光度法与４９０ｎｍ波长处分别测定吸光度。以葡萄糖浓度Ｃ（ｍｇ／ｍＬ）为横坐标，吸光度Ａ为纵坐标绘制标准曲线。

还原糖标准曲线绘制：分别量取Ｏ．２ｍｇ／ｍＬ的葡萄糖溶液０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６置于１０ｍＬ试管中，依次添加水使终体积为１．０ｍＬ，空白对照为水１．０ｍＬ，各加ＤＮＳ溶液２ｍＬ，振摇混匀，放置于沸水浴中加热５ｍｉｎ，取出，迅速用流水冷却

至室温，然后加５ｍＬ水，振摇混匀，于５４０ｎｍ波长处分别测

定吸光度。以葡萄糖浓度Ｃ（ｍｇ／ｍＬ）为横坐标，吸光度Ａ为纵坐标绘制标准曲线。

１．３．３

黑木耳糖类物质的得率计算黑木耳总糖与还原糖分

别采用苯酚一硫酸法与ＤＮＳ法测定，然后按下式计算黑木耳总糖或还原糖溶出量：

黑木耳总糖或还原糖溶出量（ｍｇ）＝ＣｘＤｘｆ

式中，Ｃ为供试液浓度（ｍｇ，／ｍＬ）；Ｄ多糖稀释因素（ｍＬ）；ｆ为换算因子。

多糖含量＝总糖含量一还原糖含萤

２结果与分析

２．１葡萄糖标准曲线总糖与还原糖标准曲线见下图ｌ、

图２。

根据测定结果，采用ｅｘｃｅｌｌ进行拟合，得拟合方程：Ｙ＝

９．７２１４ｘ－－０．０５０５（Ｒ２＝Ｏ．９９７９）

根据测定结果，采用ｅｘｃｅｌｌ进行拟合，得拟合方程：Ｙ＝

０．８５３ｘ一０．０９３３（Ｒ２＝Ｏ．９９９１）

２＿２超声提取黑木耳多糖超声波提取黑木耳中总糖、还原糖及多糖的溶出量见下图３、图４及图５。

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