新生仔猪小肠上皮细胞的分离培养和鉴定

为更快捷地进行猪肠道病毒性、细菌性疾病及细胞永生化的研究提供便利,本研究使用多种酶消化法及其他培养法尝试分离培养肠上皮细胞。结果,利用组织块培养法能成功建立新生仔猪小肠上皮细胞株.获得的上皮细胞具有较强的增殖能力,22小时内贴壁并发生细胞分裂,6～7天明显增殖,10~12天汇合成单层,连续传代培养至12代,细胞基本失去上皮样特征。

w zx z. wmw .sm o g c E aml y 1 x6 m c—irsm@ . : j 2 o塞米地松对肉鸡小仔小肠肽吸收的影响

科技前沿

试本验旨在利用地米塞松构建激模型应，究研应激肉仔对鸡肠道肽吸小收的影响。选取 20只 2 0日 1龄、体质量相近的雄性A brrs ) or e (肉仔鸡，A c从机随分为个 4处理，只腹部皮下连 7续天注射 1毫升地塞每米磷松钠酸注射液 (同处理注射剂分量别为 001 5 20m5gk W )不~.. .、.、 g B最。后一注射 8次小时后5([ ): 10空) 腹称 体质取量，血、肠空采，取进行组织学、质酮、皮小肽 vG r S— a吸收l和肽转小载运体 P p 1m e T - NRA表达的检，测结果表：1地明塞米松显著降低肉仔鸡体增质量 (<5;.) 塞松米显著抑制肉仔鸡空肠外翻肠 )(P 00 ( )地2囊及刷缘状囊对小肽膜Oy St吸收 (<.5;3地米塞松显著增加仔肉鸡空肠隐深窝度 (< .5, l— a P的0 0)()P 0 )著 0显降低绒毛高度 、面积和绒毛收度/高深窝度比值< .( )对绒宽度影毛响显不著(> .5;)塞米松吸 隐P 00, 5 00P ()地 4显著低肉降仔鸡空肠小肽体 P p载 -1eT RNAm的表达 (<量. )由本验试推应激测可制抑肉仔鸡小肽吸 P 0。05 ,收生原与因空肠膜黏形态损受及，肽运载转体P p l产 、J T—e RmAN表达量受到抑制有关。

康奶牛与临床健型乳腺奶炎牛乳核腺白蛋组差异表达分析亚胞细蛋白质的组优在点于对丰度低蛋的白研，用亚究胞细蛋白质组的研学究略，策以提高低丰运 度蛋可白质双在向泳电中检的数量出。过通分析奶牛腺乳乳炎腺与正常腺乳核白组蛋异表差达情况 .为奶牛腺炎发病机乳理研寻找尽可究能的生物多标记子分经。速超离心法分细离胞核，凝向胶电泳离分蛋.白 双用

DPuQ s. 件分析寻找差蛋异白质 斑点， et 4软7高效液色相串联离谱子质谱阱鉴蛋白定质从核。白组蛋2 DE 一 图谱中筛出选 22差个表异达的蛋质白斑点，鉴谱定出 1质7个差异表达的蛋白质。个2白质在蛋乳腺发炎 病过程 中调下 7个上，

调，5只在个正常情况下达表，只表在达乳腺炎组织 ,筛中选的出差表达异蛋质白 3涉个及 胞细骨架构成、谢调及凋亡调节控等许多方面。明表牛奶腺乳炎发时乳生腺组织核结构和代谢状都态代 发生了的变化 。 猪 胸膜炎放肺杆线菌、肺炎支原体和多杀性氏杆菌联合巴检测片的芯研制及应用本研究在建旨联合检立测胸膜肺放炎线杆菌、肺炎支原和体多杀性巴氏杆菌的 DNA 片芯用 7个 猪从 3种病菌基因中扩组出的不增同特异性靶 DAN制作基芯因片 并，对片芯靶的 DNA和探针度浓、温交杂

、度重性复特异、和性敏灵度进行研了。究结果表明，测 芯片特的异性强，测试与的李氏放杆菌线、鼻检能 支原猪体和副嗜血猪杆菌等 9病种原区分；灵敏度，在 5高 0 L标记反体系应中，能检测到~ 01p 0 g5基组 NAD,片可重复利 。用用片芯对4芯株 4目标菌的不同型标 菌株、准离株和疫株苗进行检了测其信 号 . 分 值≥1 0,号噪音￣ ( 0信 s0NR)。用芯片对 4≥ 6头病5猪和9 7健头猪康的床样临选品择培养进物行 r测其 检出检率分别为多性巴杀杆氏菌 . 7 1%和4 .、胸%膜肺放线炎杆菌 4 . 19 52 2%和2 .%、猪肺炎原支体2%和 68 .0

2 .混感合率染别为分4 .2%, 722%和 2.%检测。床临样品时，片法与 P 74在芯 RC符合的率为9 87%~ 0与1分 0% .

离.定鉴法符的合为率 . 8,5 6 67 .- -0%。研究表明，制的芯片特性异强、性高、感复使重用是一种能有 效9研敏 可于用胸膜肺炎线杆放菌多杀性、巴杆氏菌和猪肺炎原支体鉴定联和检合测的新具工猪，

新 生仔猪 肠小上皮细胞分的离培养和鉴定

为更快地捷行进猪肠道病毒性、茵性疾及病胞细永生化的究提研便供利，细研究使本用种多酶消化法及其培他养法尝分试离培养肠上皮胞。细果结，用组块培养织法成功能建新立生仔猪肠上皮细胞小株获利 . 得的 上皮细胞具较强有的增殖 力能，2时小内贴壁并发生细胞分裂，~2 6 7天 明显增殖1~2天汇合成单 01层 ,续代传养培至 1代 连， 2胞细本基失去上皮样特征。置

显微镜下观察， 0代前培养细为胞角状或多卯圆倒1 ,

形，单层生长不重叠，呈路铺石状列排1,1 1￣ 2代细胞生发变形，隙增大。胞细角蛋白1 8间定二者鉴均为阳 性。电镜，下纹缘状整齐，紧密接结连清构晰见可。表果明利组用织培块法养可以获得能够连续传活力代结

、较 好猪小的上肠皮细胞 今 日畜兽牧医● 21 0 0年第4期

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