大肠菌群测定
食品卫生微生物学检验 大肠菌群测定
1 主题内容与适用范围 本标准规定了食品中大肠菌群的测定方法。 本标准适用于食品中大肠菌群的测定。 2 术语 大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来源于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。 食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。 3 引用标准 GB 4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂 4 设备和材料 4.1 温箱:36±1℃。
4.2 冰箱:0~4℃。 4.3 恒温水浴:44.5±0.5℃。 4.4 天平。 4.5 显微镜。
4.6 均质器或乳钵。 4.7 平皿:直径为90mm。 4.8 试管。 4.9 吸管。
4.10 广口瓶或三角烧瓶:容量为500mL。 4.11 玻璃珠:直径约5mm。 4.12 载玻片。 4.13 酒精灯。 4.14 试管架。 5 培养基和试剂 5.1 乳糖胆盐发酵管:按GB 4789.28中4.9规定。 5.2 伊红美蓝琼脂平板:按GB 4789.28中4.25沥规定。 5.3 乳糖发酵管:按GB 4789.28中4.10规定。 5.4 EC肉汤:按GB 4789.28中4.11规定。 5.5 磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中3.22规定。 5.6 生理盐水。 5.7 革兰氏染色液:按GB 4789.28中2.2规定。 6 检验程序 大肠菌群检验程序如下: (图略) 7 操作步骤 7.1 检样稀释 7.1.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1∶10的均匀稀释液。固体检样最好用均质器,以8 000~10000r/min的速度处理1min,做成1∶10的均匀稀释液。 7.1.2 用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混匀,做成1∶100的稀释液。 7.1.3 另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1支1mL灭菌吸管。 7.1.4 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释度接种3管。 7.2 乳糖发酵试验 将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发酵管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管,置36±1℃温箱内,培养24±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进行。 7.3 分离培养 将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃温箱内,培养18~24h,然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验。
7.4 证实试验 在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1~2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置36±1℃温箱内培养24±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。 7.5 报告 根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)大肠菌群的MPN值。 8 粪大肠菌群(faecal coliform) 8.1 用接种环将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物(见7.2条)转种于EC肉汤管内,置44.5±0.2℃水浴箱内(水浴箱内的水面应高于EC肉汤液面),培养24±2h,经培养后,如所有EC肉汤管均不产气,则可报告为阴性;如有产气者,则将所有产气的EC肉汤管分别转种于伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃培养18~24h,凡平板上有典型菌落者,则证实为粪大肠菌群阳性。 8.2 结果报告 根据证实为粪大肠菌群的阳性管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)粪大肠菌群的MPN值。 大肠菌群最可能数(MPN)检索表
大肠菌群的测定 2007.8.28 孙建军 目录 ? 一.基本概念 基本概念 ? 二.大肠菌群检验步骤 大肠菌群检验步骤 ? 三.注意事项 注意事项 目前,大肠菌群检验方法...
大肠杆菌测定_化学_自然科学_专业资料。食品安全监测大肠菌群的测定大肠菌群:一群能发酵乳糖,产酸产气, 需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽 孢杆菌. 分布:分布较...
大肠菌群测定_生物学_自然科学_专业资料。大肠菌群测定小组成员:蔡川川 金思利 杜梦娇 叶岳成 郑文龙 讨论的问题 依据GB4789.3-2010,讨论若进行 食品中大肠菌群...
大肠菌群测定_化学_自然科学_专业资料。GB4789.3-2010 大肠菌群测定 GB4789.3-2010 大肠菌群测定 ? 定义:大肠菌群:一群在36℃培养48h可发 酵乳糖、产酸产...
_食品中大肠菌群的测定_化学_自然科学_专业资料。食品中大肠菌群的检验与 分析参考 GB4789.3-2010 一、 目的 1、 了解大肠菌群的定义及食品中大肠菌 群测定在...
大肠菌群测定_自然科学_专业资料。食品中大肠菌群的测定大肠菌群分布较广,在温血动物粪便和自然界广泛存在。调查研究表明,大肠菌群细菌多存在于温血动 物粪便、人...
大肠菌群测定步骤_自然科学_专业资料。今日推荐 116份文档 2014一级建造师考试 一级建造师《建设工程项目管理》 《建设工程经济》计算题考点及例题 《建筑工程管理...
实验五 食品中大肠 菌群的计数参考 GB4789.3-2010 一、 目的 1、 了解大肠菌群的定义及食品中大肠菌 群测定在食品卫生检验中的意义。 2、练习并掌握大肠菌群...
实验八 大肠菌群最近似数的测定大肠菌群:coliforms 最近似数:most probable number,MPN 概念:大肠菌群系指一群在37℃ 24h能 发酵乳糖产酸产气,需氧或兼性厌氧...
常州市武进区环境监测站作业指导书名称:水质 总大肠菌群测定作业指导书 文件编号:WJES/QZ-0030-2003 第1页 共 6页 水质 总大肠菌群测定作业指导书 1 1.1 ...
食品中大肠菌群的测定_生物学_自然科学_专业资料。实验四 食品中大肠菌群的测定 一、实验目的 ? 掌握大肠菌群的原理及其检验方法,以判别 食品的卫生质量 ? 了解...
水中大肠菌群的测定_化学_自然科学_专业资料。水体卫生质量评价水中大肠菌群的测定 一、目的要求 1.了解和学习大肠菌群的测定原理 和测定意义。 2.学习和掌握水中...
我要评论