植物类胡萝卜素含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法

类胡萝卜素( carotenoid)是一类重要的天然色素的总称,普遍存在于动物、高等植物、真菌、藻类的黄色、橙红色或红色的色素之中。类胡萝卜素是体内维生素A的前体,同时还具有抗氧化、免疫调节、抗癌、减轻心血管疾病及着色剂等作用。

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第2页共3页试管中。

3、用提取液冲洗研钵或匀浆器，将所有冲洗液转入10mL 离心管或试管中，用提取液定容至10mL，置于黑暗条件或者包上锡箔纸浸提3h （期间可以颠倒混合2次），观察底部组织残渣接近于白色则提取完全，若组织残渣未完全变白，继续浸提至组织残渣颜色接近于白色。

二、测定步骤：

A、黄色或其他非绿色组织（不含叶绿体）类胡萝卜素含量测定步骤：

1、分光光度计预热30min 以上，调节波长至440nm，用提取液调零。

2、取上层浸提液1mL 于1mL 玻璃比色皿中，测定440nm 处吸光值，记为A 440。

B、新鲜植物叶片或其他绿色组织（含叶绿体）类胡萝卜素含量测定步骤：

1、分光光度计预热30min 以上，调节多波长至470nm、646nm 和663nm，用提取液调零。

2、取上层浸提液1mL 于1mL 玻璃比色皿中，测定470nm、646nm 和663nm 处吸光值，分别记为A 470、

A 646和A 663。

注意：若上层浸提液有残渣，可吸取1.2mL 上层浸提液置于1.5mL 棕色EP 管，常温下4000r/min 离心5min，再取上清液检测。

三、类胡萝卜素含量的计算

A、黄色或其他非绿色组织（不含叶绿体）类胡萝卜素含量的计算公式：

类胡萝卜素含量（mg/g 鲜重）=A 440÷（ε×d）×V 样总×1000÷W×F

=0.04×A 440×F÷W

V 样总：提取液总体积，0.01L；1000：单位换算系数，1g =1000mg；ε：类胡萝卜素经验消光系数，250L/g/cm；d：比色皿光径，1cm；F：稀释倍数；W：样本质量，g。

B、新鲜植物叶片或其他绿色组织（含叶绿体）类胡萝卜素含量的计算公式：

C a （mg/L）=12.21×A 663-2.81×A 646

C b （mg/L）=20.13×A 646-5.03×A 663

类胡萝卜素浓度：C c （mg/L）=（1000×A 470-3.27×C a -104×C b ）÷229

=4.367×A 470-0.014×C a -0.454×C b

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