微波法与传统工艺提取茯苓多糖的比较研究

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JournalofClinicalandExperimentalMedicineVol.6,No.11　Nov.2007

微波法与传统工艺提取茯苓多糖的比较研究

陈端端(泉州市中医院　福建　泉州　362000)

　　茯苓为多孔菌科植物(PoriacocosWolf)其菌核供药用,具有利水渗湿,健脾宁心等功能[1]。茯苓中含有茯苓多糖,其结构是β-1,3-葡萄糖单位、50一个β-1,6葡萄糖基支链和1～2个β

-1,6葡萄糖结合的葡萄糖基间隔结合而形成。然而茯苓多糖

经验交流

因素法实验选取影响较大的三个因素:如提取时间、微波功率和液固比,运用正交法设计实验,选用三因素三水平来确定微波法提取茯苓多糖的最佳条件。根据表1选用L9(34)正交表进行实验,每组重复3次。正交结果略。微波提取法中各个因素的最佳提取条件是A3、B3、C2,即微波提取最佳工艺条件是时间90s,微波功率540W,提取液固比5倍。见表1。

表1　A(s)

60

无抗肿瘤活性,将茯苓多糖中以β-1,6结合的葡萄糖单位Smith降解方法去处后即得具抗肿瘤活性的新茯苓多糖

[2]

。

对茯苓多糖的研究已有二十余年,但水溶性多糖的提取率却难以得到明显的提高。曾有人用超声方法提取,但提取率最高只能达到1.6%。与传统的萃取方法相比,高、操作时间短、溶剂消耗量少、定成分等优点,主要提取剂

[3]

(W)

180360C()

35

。,但

2.2　两种方法条件及多糖得率比较　根据两种提取方法所选定

。本文将微波辐射应用于茯苓多糖的提取,并与传统的浸泡水煮提取工艺进行了对比研究,探索水溶性多糖的最佳提取工艺。

1　材料和方法

1.1　试剂与材料　白块茯苓(产地安徽亳州);d-葡萄糖,分析

的最佳工艺条件,得白色胶状提取物,经Sevag去蛋白多次及

Smith降解后,多糖得率测定结果见表2。

表2　两种方法条件和多糖得率比较

提取方法微波法传统法

条件

540W,提取90s,液固比5沸水1h,液固比5,提取2次

多糖得率(%)

2.41.3

纯,北京化工厂;95%乙醇,分析纯,天津化学试剂有限公司;苯酚,分析纯,天津市天然精细化工开发中心,其余试剂皆分析纯,水为二次重蒸水。

1.2　仪器　分光光度计,上海精密科学仪器有限公司生产;WD900(MG-5513M)微波炉,LG电子(天津)电器有限公司生

　　从表2可知微波法能显著提高茯苓的多糖提取率,比传统浸泡水煮法高出约85%,且微波加热具有速度快、操作便捷、能保持茯苓原有营养成分等诸多优点,是理想的茯苓多糖提取新工艺。

3　讨论

产;鼓风干燥箱,天津市三水科学仪器有限公司生产;电热恒温水浴槽,上海医疗器械三厂生产;RI-52旋转蒸发器,出自上海安亭电子仪器厂;SHB-ⅢA循环水式多用真空泵,出自郑州长城科工贸有限公司。

1.3　提取方法

1.3.1　传统工艺　称取150g的茯苓粉末,加入5倍量的水提

微波萃取是指使用适合的溶剂在微波反应器中从天然药用植物、矿物、动物组织中提取各种化学成分的技术和方法。高岐等[4]研究了微波加热快速测定植物样品总糖量,与经典方法相对照,分析速度提高近150倍。刘依等[5]利用微波法快速地提取了板蓝根中的多糖。孙萍等[6]首次运用微波技术从红景天中提取出多糖,并对其含量进行了测定,反应时间缩短为1/12,说明此提取方法具有高效节能、杂质含量少等优点,可望在有效成分提取方面发挥更大作用。

微波具有电磁性,它有相互垂直的电场和磁场。电场能够引起偶极转动和离子迁移,从而引起分子运动,极性分子在微波电磁场的作用下,产生瞬间极化,并以24.5亿次/s的速度做极性变换运动,从而产生键的振动、撕裂和粒子之间的相互摩擦、碰撞,使分子活性部分更好地接触和反应,同时迅速生成大量的热能。物质吸收微波能,细胞内部温度迅速上升,压力超过细胞壁膨胀承受能力,使细胞破裂,细胞内有效成分自由流出,被介质捕获并溶解。

由此可见,微波萃取技术有设备简单、适用范围广、能量损失小、萃取速度快、节省试剂等优点。因此,很适合植物多糖的提取分离。参考文献

[1]　国家药典委员会.中国药典(一部)[S].北京:化学工业出版社,

2000:193.

取。先升温至60℃,在60～70℃保持40min后,在沸水中提取1

h,离心,留取上清液,残渣再提取一次,合并两次的提取液减压浓

缩至1/10,用Severge法除蛋白,至少重复6次以上;清液再减压浓缩,继而用3倍量的乙醇沉淀多糖,于冰箱中过夜,离心,得沉淀物,干燥,Smith降解,透析,真空干燥,备用。

1.3.2　微波提取　称取150g的茯苓粉末,放入圆底烧瓶,加入

适量的水,按一定条件(时间

、功率、液固比)在微波炉内浸提茯苓多糖,离心,留取上清液,并减压浓缩至1/10,之后的各步骤同传统工艺。

1.4　多糖的测定　采用苯酚-硫酸比色法,以葡萄糖为标准品。100μg/ml葡萄糖标准溶液,5%苯酚溶液。标准曲线的绘制:吸

取100μg/ml葡萄糖标准溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml,1.0

ml、1.2ml及1.4ml,各以水补至2.0ml,然后加入5%苯酚溶液1.0ml及浓硫酸5.0ml。静置10mim,摇匀,在室温下放置20min后于490nm处测吸收度,得回归方程A=0.0568C+0.0058,r=0.9996,多糖含量=100C×D×f/W。2　结果

2.1　微波法工艺提取条件的确定　微波法中影响多糖得率的因

素很多,如提取时间、温度、微波功率、液固比、pH值等。通过单

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