药片中维生素D含量的测定方法

测定药片中的维生素D含量的方法

摘要：本方法采用高效液相色谱法测定维生素D(包括维生素D2和D3,下同)及

其制剂、维生素AD制剂或鱼肝油中所含维生素D及前维生素D经折算成维生素D

的总量，以单位表示，每单位相当于维生素D是0.025μg。

关键词： 高效液相色谱法、维生素D、半暗室、避免氧化、第一种方法、第二

种方法 、第三种方法

引言：本方法采用高效液相色谱法测定维生素D(包括维生素D2和D3,下同)及其制剂、维生素AD制剂或鱼肝油中所含维生素D及前维生素D经折算成维生素D的总量，以单位表示，每单位相当于维生素D是0.025μg。 测定应在半暗室中及避免氧化的情况下进行。

无维生素A醇及其他杂质干扰的供试品可用第一种方法测定，否则应按第二种

方法处理后测定；如果按第二种方法处理后，前维生素D峰仍受杂质干扰，仅有维生素D峰可以分离时，则应按第三种方法测定。

第一种方法

(1)对照品贮备溶液的制备

根据各制剂中所含维生素D的成分,精密称取相应的维生素D2或D3对照品25mg,置100ml棕色量瓶中，加异辛烷80ml，避免加热，用超声处理助溶1分钟使完全溶解，加异辛烷至刻度，摇匀，充氮密塞，避光，0℃以下保存。

测定维生素D2时，应另取维生素D3对照品25mg，同法制成维生素D3对照

品贮备溶液，供系统适用性试验用。

(2)内标溶液的制备

称取邻苯二甲酸二甲酯25mg，置25ml量瓶中，加正己烷至刻度，摇匀。

(3)色谱条件与系统适用性试验

用硅胶为填充剂，正己烷－正戊醇（997∶3)为流动相，检测波长为254nm。量取维生素D3对照品贮备溶液5ml，置具塞玻璃容器中，通氮后密塞，置90℃水浴中加热1小时，取出迅速冷却，加正己烷5ml，摇匀，置1cm具塞石英吸收池中，在2支8W主波长分别为254和365nm的紫外光灯下，将石英吸收池斜放成45°,并距灯管5～6cm,照射5分钟,使溶液中含有前维生素D3、反式维生素D3、维生素D3和速甾醇D3；取此溶液注入液相色谱仪，测定维生素D3的峰值，先后进样5次,相对标准偏差应不大于2.0％；前维生素D3(与维生素D3的比保留时间约为0.5)与反式维生素D<[3] >(与维生素D3的比保留时间约为 0.6)以及维生素D3

与速甾

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