现代分子生物学整理

分子生物学整理

名词解释

1.聚合酶链反应（PCR）：是指通过模拟体内DNA复制方式在体外选择性地将DNA某个特定区域扩增出来的技术。

2.c-DNA文库： 把一个细胞中某以时刻所有mRNA为模板，反转录合成它们的互补DNA（cDNA）。然后所有的cDNA克隆至大量载体上导入大量细菌，而得到的一个cDNA集合体，就称为cDNA文库。

3.基因文库：用DNA重组技术将某种生物的总DNA用特定的限制性内切酶切割成一个个片段，然后将这些片段随机地连接在某些质粒或其他载体上，再将它们转移到适当的宿主细胞中，通过细胞的增殖而构成各个片段的无性繁殖系（克隆），当这些克隆多到可以包括某种生物的全部基因时，这一批克隆的总体就称为该种生物的基因文库。

4.单核苷酸多态性（SNP)：指基因组内特定核苷酸位置上存在两种（或以上）不同核苷酸且出现频率大于1%的现象，并起始特定基因转录的一段DNA序列。

5.RACE技术：快速分离基因的方法，在已知cDNA序列的基础上克隆出5‘端或3'端缺失序列的技术。

6.DNA印记法Southern blotting：Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。

7.RNA印迹杂交（Northern blotting）：这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。DNA印迹技术由Southern于1975年创建，称为Southern印迹技术，RNA印迹技术正好与DNA相对应，故被称为Northern印迹杂交，与此原理相似的蛋白质印迹技术则被称为Western blot。

8.蛋白质印记法（Western blotting）：Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。

9.RNA干涉（RNAi）：是利用双链小RNA高效,特异性降解细胞内同源mRNA,从而阻断体内靶基因表达，使细胞出现靶基因缺失表现型的方法。

10.基因芯片：基因芯片（又称 DNA 芯片），系指将大量（通常每平方厘米点阵密度高于400）探针DNA分子固定于支持物上后与标记的样品分子进行杂交，通过检测每个探

第1页下一页