濒危药用植物青天葵器官大小调控基因EBP1的克隆与分析

分子植物育种， 2 0 1 3年，第 1 1卷，第 5期，第 5 7 1— 5 7 7页 Mo l e c u l a r P l a n t Br e e d i n g, 2 0 1 3, Vo 1 . 1 1, No . 5, 5 71— 5 7 7

研究报告 Re s e a r c h Re p o r t

濒危药用植物青天葵器官大小调控基因 E B P 1的克隆与分析 黄琼林梁凌玲何瑞”詹若挺 同等贡献作者通讯作者， v i p . r u i h e@g z u c m. e d u . c n; p e r f e c t h q l@1 6 3 . c o m

陈蔚文”

广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心，岭南中药资源教育部重点实验室，广州， 5 1 0 0 0 6

摘要

表皮生长因子受体 3结合蛋￣( E r b B 3 b i n d i n g p r o t e i n, E B P 1 )是植物器官大小生长的关键调控因子。

本研究应用 R AC E . P C R技术从濒危药用植物青天葵 ( N e v i l i a f o r d i i ( Ha n c e ) S c h l t r . )中克隆获得 E B P 1编码基 因并命名为 N f E B P 1。该基因全长为 1 1 8 8 b p( G e n b a n k登记号 J N8 5 4 2 4 5 ),编码 3 9 5个氨基酸。生物信息学分析表明， N f E B P 1蛋白分子量为 4 3 . 4k D,等电点为 6 . 1 2,整体表现为亲水性。 N f E B P 1不含信号肽、叶绿体转运肽或线粒体靶向肽，整体位于细胞膜外；其二级结构由 2 1个0 1 .一螺旋、 2 1个延伸链、 1 8个 B一转角和 2 8个随意卷曲构成。N f E B P 1含有 P A 2 G 4细胞增殖功能域，与其他植物 E B P 1有着高度的同源性，均归属 A P P

Me t A P超级家族。N f E B P 1在青天葵不同组织均有表达，相对表达量以叶片最高，球茎次之，叶柄则最低。本研究成功克隆青天葵 E B P 1基因并分析其在青天葵不同组织的表达水平，为下一步利用该基因促进青天葵 器官生长研究提供了基础数据。 关键词青天葵， E B P 1基因，克隆，分析

Cl o n i n g a n d An a l y s i s o f a n Or g a n S i z e Re g u l a t o r Ge n e E BP 1 f r

o m Ne r v i l i a

f o r d i i ( Ha n c e ) S c h t l r . Hu a n g Q i o n g l i n L i a n g L i n g l i n g’ He R u i Z h a n R u o t i n g C h e n We i we n Re s e a r c h C e n t e r o f Ch i n e s e Me d i c i n a l Re s o ur c e S c i e nc e a n d En g i n e e in f g, Gu a ng z h o u Un i v e r s i t y o f Ch i ne s e Me d i c i n e,Ke y L a b o r a t o r y o f Ch i n e s e

Me d i c i n a l R e s o u r c e f r o m L i n g n a n, G u a n g z h o u U n i v e r s i y t o f Ch i n e s e Me d i c i n e, G u a n g z h o u, 5 1 0 0 0 6 Th e s e a u t h o r s c o n t r i b u t e d e q u a l l y t o t hi s pa p e r

”C o r r e s p o n d i n g a u t h o r, v i p . r u i h e@g z u c m. e d u . c n; p e r f e c hq t l@1 6 3 . c o m DOI:1 O . 3 9 6 9/ mp b. 0 1 1 . 0 0 0 5 7 1

Ab s t r a c t E r b B3 b i n d i ng p r o t e i n i s a k e y r e g u l a t o r o f o r g a n s i z e i n p l a n t s . An EB P1 g e n e wa s c l o n e d f r o m

f o r d i i b y A C R E— P C R a n d n a me d a s N f E B P 1( G e n b a n k a c c e s s i o n n u mb e r J N8 5 4 2 4 5 ) . T h e O R F o f N f E B P 1 c o n t - a i n e d 1 1 8 8 b a s e p a i r s e n c o d i n g 3 9 5 a mi n o a c i d s . T h e mo l e c u l a r we i g h t o f N f E B P 1 p r o t e i n wa s 4 3 . 5 k D

, t h e i s o e l e c t r i c p o i n t wa s 6 . 1 2, a n d i t s o v e r a l l s t r u c t u r e e x h i b i t e d h y d r o p h i l i c . N f E B P 1 c o n t a i n s n o s i g n a l p e p t i d e, c h l o r o p l a s t t r a n s i t p e p t i d e,m i t o c h o n d r i a l t a r g e t i n g p e p t i d e,a n d l o c a t e d e n t i r e l y o u t s i d e c e l l me mb r a n e .T h e

p r e d i c t e d s e c o n d a r y s t r u c ur t e o f N f E B P 1 wa s c o mp o s e d o f 2 1 O L— h e l i x e s, 2 1 e x t e n d s t r a n d s, 1 8 B— ume t r s a n d 2 8 r a n d o m c o i l s . N f E B P 1 s h o we d h i g h h o mo l o g y w i t h E B P 1 p r o t e i n r f o m o t h e r p l a n t s, a n d p o s s e s s e d a f u n c t i o n a l d o ma i n P A2 G 4 . N/ E P B 1 wa s u b i q u i t o u s l y e x p r e s s e d i n a l l t i s s u e s o f i V . f o r d i i . a n d t h e r e l a t i v e e x p r e s s i o n l e v e l r e a c he d t h e h i g h e s t i n l e a f,a n d t h e l o we s t i n p e t i o l e .Th i s s ud t y p r o v i d e d a ir f mf o u nd a t i o n f o r p r o mo t i ng o r g a n

s i z e o f N . f o r d i i b y ma n i p u l a t i n g E B P 1 . Ke y w o r d s N e r v i l i a f o r d i i ( H a n c e ) s c h l t r, E B P 1, C l o n i n g, na A l y s i s

青天葵

为岭南道地贵重药材，来源于兰科植物具有润肺止咳、清热解毒、散瘀止痛的功效，对小儿 毛唇芋兰 Ne r v i l i a f o r d i i ( Ha n c e ) S c h l t r .的叶片或全株， 呼吸道疾病疗效显著，市场需求量大(陈蔚文， 2 0 1 0, 收稿日期： 2 0 1 3 - 0 2 - 0 4 接受日期： 2 0 1 3— 0 4— 1 8 网络出版日期： 2 0 1 3— 0 5— 2 1

URL: h t t p:// 5 t h . s o p h i a p u b l i s h e r . c o m/ a b s t r a c t一 1 3 9 3一 mp b o p a

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