家蚕基因特异性CAPs标记获得及其分子系统学应用

选取家蚕attacin和alpha-amylase基因序列,设计特异性引物,在家蚕品系P50、C108和子一代 (F1) 中扩增。分别采用4种不同的限制性内切酶对扩增产物酶切,最后每个基因都获得了一个CAPs分子标记。依据所得的两个CAPs分子标记对12个品系的家蚕遗传多样性进行了初步研究,构建了其

!遗!传!"##"#"$%&’(!)*++-!"$%#!$%%$!&&$,."

研究报告

家蚕基因特异性,ML>标记获得及其分子系统学应用

!

黄健华’!苗雪霞’!李木旺’!黄勇平’!张!勇’!赵卫国!!

!"上海!镇江!’H中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所$&&&*!)!H中国农业科学院镇江蚕业研究所$’!&’%

摘!要!选取家蚕/设计特异性引物$在家蚕品系LP00/1+-和/24/5/62/8*基因序列$$&*,’&%和子一代!’"中扩37增(分别采用#种不同的限制性内切酶对扩增产物酶切$最后每个基因都获得了一个,ML>分子标记(依据所得的两个,构建了其分子系统树(ML>分子标记对’!个品系的家蚕遗传多样性进行了初步研究$关键词!家蚕)多态)酶切)分子系统树,ML>标记)中图分类号!Q"$!!!文献标识码!M!!!

文章编号!!"&!$*R(""!!&&$&#R&$%#R&$

!"#$%’()(*(+,+-!.+/(01.+234$5)6721#2)7,8!"#(29)#&(,:#,#*(%;(<#2)(*,85"0+#,#*(%?#07*(+,)"(=7=>@

’’’$!’

$$STMG;+C<=0S2<UJMV/270/C<WJU201<=XSMG;Y4=B$B$

!’$XSMV17C0;24STMG;Y4=0LC=BB

!(4/-4/+%-80+0:0*;<=2/-0=48+;2;->"1;2;(4/-4/+%-80+0:0*8<;?)+;2;+1/2(1+*-1*8$@4+-*8*’1/>*6<(1+*-1*8$’9.7/.7$.7..7;

(4/-4/+!&&&*!$@4+-/)(*?+1:20:?/2#*8*/?14%-80+0:0*$@4+-*8*’1/>*6<’?+1:20:?/2(1+*-1*8$A4*-+/-’!&’%$@4+-/"!9.7;.,.!

#"$$A)*27%*,F7<K78<@FC?C7834F@45ACD>727=D7!,ML>@<5[75><579<>784=L,\<@FC?CD<6C4=4?[=4I=B7=7>3:3Z3

$D]GM>727=D7>45\ML]>727=D7>HEA7L,\35482D6><578C7>67897>65CD6C4=7=^@7>7=75<6C=A7>C@F7ZZB:5:BB6300/1+-<=8/24/5/6574?8<6<<>A76754^467><=8A4@4^467>HS757I787>C=7835C@75>9<>784=>CF[I45@/6:3:B:B3B

$2/8*B7=7>6A7=8C7>6786A7L,\35482D6>C=>CF[I45@>65<C=>L$&$,’&%<=86A7C53547=>C=C??757=6570’27BB:PB#8

$6A7B7=76CD8CK75>C6=83F47=76CD57F<6C4=>AC?’!>CF[I45@>65<C=>>65CD6C4=7=^@7>57>7D6CK7FHP256A75@457A:<:B34:3:

I757C=K7>6C<6782>C=6A7496<C=786I4,ML>@<5[75>HBB

#))")B#+28));6BC6;?+!WH,ML>4F@45AC>@)7=^@78C7>6C4=@4F7D2F<587=8545<@3:37:BB=.

遗传稳定!!分子标记在生物体中具有数量丰富*

以及操作简便等特点(目前$分子标记在家蚕研究

&’!*#$$&中被用于遗传图谱构建%分子遗传育种%和*&)$"遗传多样性研究%等(到目前为止$所采用的分

注$如MPWL*\ML]*..\*J..\等等(本文提及的,ML>!,F7<K78M@FC?C78L4F@45ACD.727=D7"3:3Z也是一种以L又称为L,\为基础的分子标记!,\0

%&%$(

先进行L然后(其基本步骤是#\PWL",\扩增$

子标记主要分为两类#一类是以.426A75=杂交技术为核心的分子标记$如\另一类是以LPWL),\技术为核心的分子标记$快捷高效L,\技术因其简便*等特点在分子标记技术的发展上受到了广泛的关

收稿日期!修回日期!!&&#&%’&"!&&#&(&)

将L再用琼脂糖,\扩增产物用限制性内切酶酶切$凝胶电泳将]用溴化乙锭染色*观察(GM片段分开$,ML>标记所采用的L,\引物是针对特定的基因序列而设计$序列源自基因组数据库*D]GM序列以及

基金项目!上海市科学技术委员会基础研究重点项目基金!编号#及中科院重要方向项目!编号#&*+,’#&"""-.,/!0.10*’%"%.245678933:

!";5<=6>?54@.A<=A<C,4@@C>>C4=4?.DC7=D7<=8E7DA=4F4G4H&*+,’#&""<=8-=4IF787J==4K<6C4=L545<@?54@,AC=7>7MD<87@B:BBB:"&4?.DC7=D7>!,M."!G4H-.,/!0.10*’%

作者简介!黄健华!$男$江苏人$在读博士研究生$研究方向#昆虫功能基因研究(N#’(%&’"0@<CFAA2<=C5C>H>CH<DHD="33OB

通讯作者!黄勇平!$男$陕西人$研究员$博士生导师$研究方向#昆虫功能基因研究(N#)#’()*’"0@<CF4=C=5C>H>CH<DHD=E7F&!’0B333:B"C

$#(!#&#"

致!!谢!本研究得到中科院昆明动物研究所细胞与分子进化开放实验室苟世康*吴世芳*林世英*朱春玲*庞俊峰*向余劲功*聂龙等老师在

实验上的帮助$谨致谢意+

第1页下一页