园艺学报,2015,42 (3):585–590.
Acta Horticulturae Sinica doi:10.16420/j.issn.0513-353x.2014-0545;http://www. ahs. ac. cn 585 山东牡丹黑斑病的病原菌鉴定与ITS序列分析 石良红,赵兰勇*,吴 迪,王 玉,姜 琳,杨 暖
(山东农业大学林学院,山东泰安 271018)
摘 要:牡丹黑斑病的致病菌尚不明确。通过对泰安地区的牡丹病叶进行组织分离,利用分子生物
学技术结合形态学方法对病原菌进行鉴定,并利用Mega5软件对链格孢属的22个种进行系统发育树分析,
进一步明确其分类地位。结果表明:该病致病菌ITS序列与GenBank中登录的Alternaria alternata、A.
tenuissima、A. metachromatica相似性均为100%,利用DNAMAN软件对核苷酸一致性进行比较,发现样
品菌株与A. alternata的一致性最高,结合形态学方法鉴定该病致病菌为链格孢A. alternata(GenBank登
录号为:KJ682317)。回接鉴定后分离得到的菌株,菌饼刺伤接种的病叶与无伤接种的病叶均发病,但刺
伤叶片病斑扩展快。
关键词:牡丹;黑斑病;链格孢;ITS序列分析;鉴定
中图分类号:S 685.11 文献标志码:A 文章编号:0513-353X(2015)03-0585-06
The Identification and Analysis of ITS Sequence on Tree Peony Black Spot in Shandong
SHI Liang-hong,ZHAO Lan-yong*,WU Di,WANG Yu,JIANG Lin,and YANG Nuan
(College of Forestry,Shandong Agricultural University,Tai’an 271018,China)
Abstract:The pathogens of tree peony black spot remained unclear. The aim of this research was to clarify its taxonomic status by identifying the pathogen of tree peony black spot. In this study,the pathogen was identified based on morphology and molecular identification,the ITS phylogenetic trees was generated with the soft of Mega 5. The result suggested that the pathogen of tree peony black spot was Alternaria alternate(Genbank Accession No. KJ682317). The homology between the sample strain and A. alternate was up to 100 percent. The wound leaves and the intact ones were both infected by the pathogen. However,the expansion rate of the disease spot on the wound leaves was faster than the intact ones.
Key words:tree peony;black spot;Alternaria alternata;analysis of ITS sequence;identification
近年来,中国牡丹种植面积不断扩大,牡丹病害日趋严重,其中牡丹黑斑病就是其中之一。发病时叶片出现灰黑色近圆形病斑,有黑色霉状物产生,严重时造成叶片穿孔,脱落,对植株生长造成极大危害(段亚冰,2009)。目前,对该病研究不多,只有简单的病征记录和防治研究,对致病菌只是模糊地描述为链格孢属(Alternaria)真菌(栾飞,2011),尚无明确结论,这对病害预测预报和防治工作造成障碍。
收稿日期:2014–09–12;修回日期:2015–01–27
基金项目:山东省农业良种工程项目([2012]213号)
* 通信作者 Author for correspondence(E-mail:sdzly369@163.com;Tel:0538-6132011)
其中牡丹黑斑病等 7 种病害的病原经形态学鉴定已经确定,分别是 ( Alternaria. ...III 的 rDNA 的 ITS 序列进行了 PCR 扩增,并对扩增产物进行了克隆和序列分析...
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