当前位置： 文档下载 > 所有分类 > 高等教育 > 农学 > 各生理指标实验步骤有关植物生理实验的指标测定的方法
1丙二醛（MDA）含量的测定
丙二醛在酸性和高温的条件下，可以和硫代巴比妥酸（TBA）反应生成红棕色的三甲川，在532nm处有最大光吸收。植物组织中可溶性糖与TBA的显色反应产物在450nm和532nm处也有吸收。测定时要排除可溶性糖的干扰，因此分别测定532nm和450nm处的吸光值，直接求得植物样品提取液中MDA的浓度；MDA含量采用硫代巴比妥酸法测定。
计算公式如下:
C(µmol.L-1)=6.45OD532-0.56OD450
进一步算出每克样品鲜重中丙二醛的含量（µmolg-1FW）。
试剂：
10%三氯乙酸（TCA） ：10g三氯乙酸定容于100ml
0.6%硫代巴比妥酸：0.6g用10%三氯乙酸TCA定容于100ml
试验步骤:
（1）取植物材料用液氮迅速研磨成粉，取0.2g左右材料，放入5ml离心管内。
（2）加入5ml 10%的三氯乙酸，提取30min后，10000r/min离心15min。
（3）取上清液2ml，加入2ml 0.6%TBA，混匀，在100℃水浴中煮15min， 冷却，冷却后再测量。
（4）分别测定532nm和450nm处的吸光值。以2ml（加TBA,水）水代替 提取液作为对照管。
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