5-aza-2dC诱导白血病细胞分化及对Annexin A1A2表达

第２８卷第３期２００８年６月

国际病理科学与临床杂志

ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ

Ｖｏｌ．２８　Ｎｏ．３

Ｊｕｎ．　２００８

·论　著·

５ａｚａ２ｄＣ诱导白血病细胞分化及对ＡｎｎｅｘｉｎＡ１／Ａ２表达

和甲基化状态的影响

肖艳华，易红，谭潭，梁婷，陈主初，肖志强

（中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室，长沙４１０００８）

［摘要］　目的：观察甲基化转移酶抑制剂５杂氮２’脱氧胞苷（５ａｚａ２’ｄｅｏｘｙｃｉｔｙｄｉｎｅ，５ａｚａ２ｄＣ）对人急性髓Ｌ６０细胞分化及对膜联蛋白Ａ１／Ａ２（ＡｎｎｅｘｉｎＡ１／Ａ２）表达和甲基化状态的影响。方法：瑞氏染色系白血病细胞系Ｈ

和流式细胞术检测５ａｚａ２ｄＣ对ＨＬ６０细胞分化的影响；ＲＴＰＣＲ法检测药物处理ＨＬ６０细胞前后ＡｎｎｅｘｉｎＡ１和Ａ２基因ｍＲＮＡ的表达水平；甲基化特异性ＰＣＲ（ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃＰＣＲ，ＭＳＰ）检测药物处理ＨＬ６０细胞前后Ａｎ２基因启动子区域ＣｐＧ岛的甲基化水平。结果：５ａｚａ２ｄＣ处理后ＨＬ６０细胞的髓系分化抗原ＣＤ１１ｂｎｅｘｉｎＡ１和Ａ的表达增强，细胞向成熟分化，且在０．５μｍｏｌ／Ｌ时其促分化作用最明显；ＡｎｎｅｘｉｎＡ１和Ａ２基因在ＨＬ６０细胞中低表达，０．５μｍｏｌ／Ｌ５ａｚａ２ｄＣ处理ＨＬ６０细胞７２ｈ后，ＡｎｎｅｘｉｎＡ１和Ａ２基因ｍＲＮＡ表达水平明显上调，而其启动子ｐＧ岛甲基化水平明显降低。结论：５ａｚａ２ｄＣ具有促进白血病细胞分化的作用，ＡｎｎｅｘｉｎＡ１和Ａ２基因启动区域Ｃ

子去甲基化可能与５ａｚａ２ｄＣ诱导白血病细胞分化有关。

［关键词］　５杂氮２’脱氧胞苷；　白血病；　ＡｎｎｅｘｉｎＡ１；　ＡｎｎｅｘｉｎＡ２；　甲基化；　分化［中图分类号］　Ｒ７３３．７　　　［文献标识码］　Ａ　　　［文章编号］　１６７３２５８８（２００８）０３０１８５０７

Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆ５ａｚａ２’ｄｅｏｘｙｃｉｔｙｄｉｎｅｏｎｃｅｌｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ

ａｎｄｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＡｎｎｅｘｉｎＡ１ａｎｄＡ２ｇｅｎｅｓ

６０ｉｎｌｅｕｋｅｍｉａｃｅｌｌｌｉｎｅＨＬ

ＸＩＡＯＹａｎｈｕａ，ＹＩＨｏｎｇ，ＴＡＮＴａｎ，ＬＩＡＮＧＴｉｎｇ，ＣＨＥＮＺｈｕｃｈｕ，ＸＩＡＯＺｈｉｑｉａｎｇ

（ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣａｎｃｅｒＰｒｏｔｅｏｍｉｃｓｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＨｅａｌｔｈ，ＸｉａｎｇｙａＨｏｓｐｉｔａｌ，

ＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０００８，Ｃｈｉｎａ）

［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ５ａｚａ２’ｄｅｏｘｙｃｉｔｙｄｉｎｅ（５ａｚａ２ｄＣ）ｏｎｔｈｅｃｅｌｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎａｓｗｅｌｌａｓｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＡｎｎｅｘｉｎＡ１ａｎｄＡ２ｇｅｎｅｓｉｎｈｕｍａｎａｃｕｔｅｍｙｅｌｏｉｄｌｅｕｋｅｍｉａ（ＡＭＬ）ｃｅｌｌｌｉｎｅＨＬ６０．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＨＬ６０ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ５ａｚａ２ｄＣ．Ｆｏｌｌｏｗｉｎｇｔｈｅｄｒｕｇｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆ５ａｚａＣｄＲｏｎｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＨＬ６０ｃｅｌｌｌｉｎｅｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＷｒｉｇｈｔｓｔａｉｎｉｎｇａｎｄｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ（ＦＣＭ）；ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＡｎｎｅｘｉｎＡ１ａｎｄＡ２ｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ（ＲＴＰＣＲ）；ＴｈｅｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＡｎｎｅｘｉｎＡ１ａｎｄＡ２ｇｅｎｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ（ＭＳＰ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ　５ａｚａ２ｄＣｅｎｈａｎｃｅｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｃｅｌｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎａｎｔｉｇｅｎＣＤ１１ｂ，ｉｎｄｕｃｅｄＨＬ６０ｃｅｌｌｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｔｏｍａｔｕｒｅｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ，ｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＡｎｎｅｘｉｎＡ１，ａｎｄｄｅｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＡｎｎｅｘｉｎＡ１ａｎｄＡ２ｇｅｎｅｓｉｎＨＬ６０ｃｅｌｌｓ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎａｎｄＡ２　５ａｚａ２ｄＣｃｏｕｌｄｉｎｄｕｃｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＨＬ６０ｃｅｌｌｓ．ＤｅｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｏｆＡｎｎｅｘｉｎＡ１ａｎｄＡ２ｇｅｎｅｓｍｉｇｈｔｂｅｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅＨＬ６０ｃｅｌｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｉｎｄｕｃｅｄｂｙ５ａｚａ２ｄＣ．

收稿日期：２００８０２２２　　　修回日期：２００８０５１７

作者简介：肖艳华（１９８２），女，湖南郴州人，硕士研究生，主要从事蛋白质组学研究。通讯作者：肖志强，Ｅｍａｉｌ：ｚｑｘｉａｏ２００１＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ

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