微波_超声波提取与常规法提取红芪多糖的比较研究

安徽农业科学,JournalofAnhuiAgri.Sci.2007,35(30):9703,9722 责任编辑 罗芸 责任校对 李菲菲

微波-超声波提取与常规法提取红芪多糖的比较研究

刘宝剑,郭彦生,刁鹏飞,陈扶香

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(1.河北北方学院,河北张家口075000;2.甘肃农业大学,甘肃兰州730070)

摘要 [目的]比较常规法和微波-超声波提取红芪多糖的差异。[方法]以红芪药材为试材,利用常规法和微波-超声波法提取红芪多糖,通过苯酚-硫酸比色法测定多糖含量,比较两种提取方法的差异。[结果]两种提取方法得到的多糖含量差别较大,常规法得多糖含量为4.19%,微波-超声波法得多糖含量为8.98%。微波-超声波法提取红芪多糖有较大的优势:提取时间大大缩短,可避免红芪多糖的分解;所用仪器简单,操作方便。[结论]微波-超声波法提取中药成分的效率高于常规提取法。关键词 红芪多糖;常规提取;微波-超声波提取;含量测定;比较研究

中图分类号 Q503 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2007)30-09703-01

ComparativeStudyonExtractingRadixhedysariPolysaccharidebyMicrowave-UltrasonicMethodandConventionalMethodLIUBao-jianetal (HebeiNorthCollege,Zhangjiakou,Hebei075000)

Abstract Theobjectiveoftheresearchwastocomparethedifferencebetweenconventionalmethodandmicrowave-ultrasonicmethodinextractingRadixhedysaripolysaccharide.WithmedicinalmaterialR.hedysariastestedmaterials,theconventionalmethodandmicrowave-ultrasonicmethodwereusedtoextractR.hedysaripolysaccharidetodeterminepolysaccharidecontentbypheno-lvitrioliccolorimetryandcomparethedifferenceof2kindsofextraction

methods.Thecontentsofpolysaccharidesobtainedfrom2kindsofextractionmethodshadgreatdifference.Thecontentofpolysaccharidesfromconvention-almethodwas4.19%andthatfrommicrowave-ultrasonicmethodwas8.98%.Microwave-ultrasonicmethodhadsuchgreateradvantagesonextractingR.hedysaripolysaccharideasthattheextractiontimewasshortenedgreatly,whichcouldavoidthedecompositionofR.hedysaripolysaccharideandthein-strumentsweresampleandconvenientinoperation.TheefficiencyofextractingcomponentsoftraditionalChinesemedicinebymicrowave-ultrasonicmethodwashigherthanthatbyconventionalextractionmethod.Keywords Radixhedysaripolysaccharide;Conventionalextraction;Microwave-ultrasonicextraction;Contentdetermination;Comparativestudy

红芪,别名岩黄芪、黑芪、独根,为豆科岩黄芪属植物多序岩黄芪的干燥根[1],因其皮色红润,故称红芪。红芪在甘肃宕昌、武都、岷县等地分布极广,既有野生品种,又有栽培品种。性温,味甘。具有补气固表、利尿解毒、排脓、敛疮生肌等功效。其主要成分为红芪多糖,现代药理研究表明,红芪多糖具有增强免疫、抗肿瘤、抗衰老、抗炎等多种作用[2]。红芪多糖的提取有很多方法,各有优缺点。笔者将微波-超声波法与常规法提取红芪多糖进行了对比研究。1 材料与仪器

1.1 材料 红芪药材(产于甘肃武都),粉碎成粉末状备用。1.2 药品 葡萄糖、无水乙醇、丙酮、硫酸、苯酚(重蒸)、乙醚,以上均为分析纯;活性炭。

1.3 仪器 OPPON-3000型紫外/可见光分光光度计、CW-2000型超声-微波协同萃取仪、RE-6000旋转蒸发器、AL104电子分析天平、电子恒温鼓风干燥箱、SHB-III循环水式多用真空泵、C型玻璃仪器气流烘干器、XW-80型旋涡混合器、KQ-3000E型数控超声波清洗器。2 结果与分析

2.1 标准曲线的制备[3]

2.1.1 标准葡萄糖溶液配制。精密称取105e干燥至恒重的无水葡萄糖25mg,置于250ml容量瓶中,加蒸馏水溶解定容至刻度。

2.1.2 标准曲线绘制。用移液枪精密吸取葡萄糖标准溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5和0.6ml置10ml试管中,分别加水至1.0ml,另取一管作为空白对照,加水1.0ml,再分别加5%苯酚1.6ml摇匀,然后快速滴加浓硫酸7.0ml,摇匀后静置5min,置沸水浴中加热15min,取出后冷却至室温,于490nm处对6种样品测定吸光度,以浓度(C)对吸光度(A)回归得方

作者简介 刘宝剑(1968-),男,河北承德人,在读硕士,助理研究员,

从事教育研究与管理。

收稿日期 2007-07-02

[1]

程。以浓度(C)为横坐标,吸光度(A)为纵坐标绘制标准曲线,得线性方程A=0.0732C+0.0038,r=0.9987,线性范围

为0.01~0.06mg/ml。2.2 换算因素的测定

2.2.1 标准多糖溶液的配制。精密称取红芪多糖0.0100g,置于250ml容量瓶中,用蒸馏水溶解并定容。

2.2.2 换算因素的测定。吸取200Ll配制好的多糖溶液,向其中加入蒸馏水1.8ml,5%苯酚溶液1.0ml,迅速滴加浓硫酸5.0ml,摇匀后静置5min,置沸水浴中加热15min,取出后冷却至室温,通过紫外分光光度计测定吸光度。平均吸光度(A)=0.0230(n=3)。

2.2.3 计算换算因素。按f=W/CD计算换算因素,式中W为多糖重量(Lg),C为多糖中葡萄糖的浓度(mg/L),D为多糖的稀释因素,计算得f=0.7628。

2.3 常规法提取及含量测定 称取红芪粉末0.4001g,用滤纸包裹置于索氏提取器中,加入100ml乙醇溶液在80e的水浴中回流2次,每次2h(去除单糖和低聚糖);过滤后,将滤渣用100ml蒸馏水在80e的水浴中提取2次,每次2h;合并两次提取液,移至250ml容量瓶中,将残渣用水洗涤2次,洗涤液并入容量瓶中,定容作为供试液;精密吸取200Ll供试液,向其中加入蒸馏水1.8ml,5%苯酚溶液1.0ml,迅速滴加浓硫酸5.0ml,摇匀后静置5min,置沸水浴中加热15min,取出冷却至室温,通过紫外分光光度计测定吸光度,测得平均吸光度A=0.044(n=3)。根据回归方程计算浓度C,计算多糖含量:多糖含量(%)=CDf/W@100%,式中W为红芪粉末重量(g),D为多糖的稀释因素;测得多糖含量为4.19%。2.4 微波-超声法提取及含量测定[4-6] 称取红芪粉末0.4001g,用100ml乙醇溶液浸泡,微波加热至80e,超声提取2次,每次20min(以去除单糖和低聚糖);过滤后,将滤渣用100ml蒸馏水,微波加热至80e,超声提取2次,每次20

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